Как обнаружить восстановленный глутатион электрохимическим способом?

 Глутатион присутствует во всех тканях млекопитающих в концентрациях от 1 до 10 мМ и представляет собой γ-амидно-связанный трипептид, состоящий из цистеина (Cys), глутамата (Glu) и глицина (Gly). Глутатион обычно существует в организме в виде восстановленного глутатиона (GSH) и его окисленной формы (L-глутатион окисленный (GSSG)) (см. рис. 1), которые превращаются друг в друга в организме и достигают динамического равновесия, поддерживая таким образом окислительно-восстановительный баланс в организме [1-2]. Изменения концентрации GSH тесно связаны с развитием определенных заболеваний в организме и тканях, и его концентрация может использоваться в качестве индикатора различных заболеваний, таких как лейкемия, болезнь Альцгеймера, СПИД, клеточная карцинома, диабет и атеросклероз[3-5] . Поэтому исследователи стремятся разработать чувствительные и селективные анализы для мониторинга динамики GSH в организме, чтобы понять химические механизмы патогенеза различных заболеваний на молекулярном уровне, а также предоставить методы и инструменты для клинической диагностики и целенаправленной терапии.

 

На сегодняшний день основными методами определения глутатиона являются высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), капиллярный электрофорез (КЭ), оптический анализ и электрохимические методы[6-9] . Электрохимические методы уже давно используются для анализа GSH благодаря простоте оборудования, низкой стоимости, миниатюризации и интеграции электродов, которые в дальнейшем могут быть превращены в портативные устройства для проведения анализов на месте и in vivo. В данной статье мы рассматриваем новые достижения в области методов определения GSH на основе электрохимических методов, о которых сообщалось в последние десятилетия, и представляем перспективы будущих исследований.

 

1 Принцип электрохимического определения GSH

Электрохимическое зондирование использует основные принципы электрохимических реакций для генерирования электрических сигналов (например, сопротивления, проводимости, потенциала, тока, потенциала и т.д.), связанных с концентрацией целевого аналита, для качественного обнаружения и количественного анализа целевой молекулы. Наиболее распространенные методы электрохимического обнаружения включают циклическую вольтамперометрию (CV), электрохимическую импедансную спектроскопию, амперометрию, хроноамперометрию, дифференциальную импульсную вольтамперометрию (DPV) и вольтамперометрию квадратных волн (SWV). GSH сам по себе электрохимически активен, т.е. может переносить электроны с поверхностью электрода, и поэтому GSH может быть обнаружен с помощью электрохимических методов. Электрохимическое обнаружение GSH можно разделить на прямой и косвенный методы. Прямой метод основан на прямом переносе электронов между GSH и электродом для количественного обнаружения GSH. Принцип заключается в том, что GSH является восстановителем с сульфгидрильными группами, и при определенном потенциале он может быть окислен на поверхности электрода путем потери двух электронов и двух протонов, в результате чего возникает окислительный ток (как показано на рис. 1), а затем генерируется окислительный ток. Окислительный ток может быть количественно определен на основе генерируемого окислительного тока для обнаружения GSH.

 

Косвенный метод заключается в косвенном количественном определении GSH на основе электрических сигналов других химических веществ. Электронный посредник обладает хорошей электрохимической активностью, и принцип представленного метода косвенного определения GSH на основе электронного посредника показан на рисунке 1[10] . Электронный посредник M сначала генерирует окисленный электронный посредник Mox путем переноса электронов на поверхность электрода, затем происходит реакция окисления между Mox и GSH, в результате которой GSH окисляется до GSSG, а Mox восстанавливается до восстановленной формы электронного посредника Mred, и окончательное количественное определение GSH может быть проведено косвенно на основе пика окисления, создаваемого Mred на поверхности электрода. Пик окисления, генерируемый Mred на поверхности электрода, использовался для косвенного количественного определения GSH. Исследователи могут выбрать различные электронные посредники в соответствии с химическими и электрохимическими свойствами GSH, чтобы улучшить чувствительность и селективность обнаружения.

 

В дополнение к непрямому электрохимическому обнаружению GSH на основе электронных посредников было описано множество электрохимических методов обнаружения GSH, основанных на сильном сродстве GSH к различным ионам металлов или металлическим наноматериалам [11-13]. GSH имеет сульфгидрильную-SH группу, которая обладает сильным сродством к Cu2+, Ag+, Hg2+, Pb2+, Co+ и наноматериалам Au, Ag, Cu, и эти ионы металлов, такие как Cu2+, Ag+, Hg2+ и Pb2+, являются электрохимически активными. Эти ионы металлов, такие как Cu2+, Ag+, Hg2+, Pb2+, являются электрохимически активными, и когда GSH добавляют в реакционную систему, он может связываться с этими ионами металлов или металлическими наноматериалами и вызывать регулярное изменение их электрохимических сигналов в разной степени, так что GSH может быть определен косвенно на основе измененных электрохимических сигналов.

В заключение следует отметить, что прямое электрохимическое определение GSH основано на электрохимическом сигнале самого GSH для количественного определения GSH, в то время как непрямое электрохимическое определение GSH основано на электрохимических сигналах других веществ для количественного определения GSH.

 

2 Электроды для подложки

Электроды-подложки, которые могут быть использованы для обнаружения GSH, включают электроды из стеклоуглерода, золотые электроды, ртутные электроды, электроды из углеродной пасты и платиновые электроды. Электрохимические датчики глутатиона на основе ртутных электродов обнаруживают GSH на основе окисления ртути на поверхности с образованием ртутно-тиолового комплекса. Это электрохимическое поведение происходит при потенциале +0,1 В. Низкий потенциал окисления позволяет обнаруживать GSH без помех со стороны других физиологически активных веществ, таких как другие аминокислоты, глюкоза, аскорбиновая и мочевая кислота. Однако ртутные электроды токсичны, электрохимический отклик на GSH замедляется с увеличением времени обнаружения, а электрохимическое поведение нестабильно и плохо воспроизводимо.

 

Аналогичная ситуация наблюдается и с другими металлическими электродами, такими как золотые и платиновые: поверхностные оксиды, образующиеся на платиновых и золотых рабочих электродах, способствуют окислению GSH, однако сульфидные отложения на поверхности металлических электродов пассивируют их, замедляя перенос электронов по мере увеличения времени обнаружения и увеличивая избыточные потенциалы, что сильно осложняет аналитическое применение. Электроды на основе углерода также неоднократно использовались для определения GSH. Например, стеклоуглеродный электрод GC имеет широкий диапазон рабочих потенциалов, а его высокая химическая инертность обеспечивает высокую точность определения, что позволяет широко использовать его в электрохимических анализах. Однако на электроде GC GSH окисляется до GSSG только при потенциале около +1,0 В. Такой высокий потенциал окисления указывает на то, что GSH имеет низкую скорость переноса электронов на электроде GC, большой избыточный потенциал и подвержен интерференции со стороны других физиологически активных веществ, что является недостатками, которые делают прямое использование голого электрода GC для определения GSH ограниченным. Для того чтобы ускорить скорость переноса электронов GSH на поверхность электрода, снизить избыточный потенциал и предотвратить пассивацию электрода в процессе детекции, в разработке электрохимических сенсоров GSH уже много раз применялась модификация наноматериалов и медиаторов электронов на поверхности электрода-подложки. Модификация наноматериалов и медиаторов электронов на поверхности электрода-подложки неоднократно применялась при разработке электрохимических сенсоров GSH. Модификация наноматериалов на поверхности электрода и иммобилизация различных видов активаторов окислительного восстановления позволяет ускорить скорость переноса электронов между GSH и электродом, снизить оверпотенциал, улучшить чувствительность и селективность.

 

3 Применение наноматериалов для электрохимического определения GSH

Из-за низкой чувствительности, плохой воспроизводимости, медленного переноса электронов и высокого избыточного потенциала голых электродов для электрохимического детектирования модификация электродов стала очень важной. В 21 веке стремительное развитие нанотехнологий принесло новые возможности в электроаналитическую химию. Наноматериалы представляют собой молекулы размером от 1 до 100 нм, что придает им уникальные свойства, такие как эффект поверхностного интерфейса, квантовый эффект размера и квантовый эффект туннелирования. Модифицируя различные наноматериалы на поверхности рабочего электрода, можно получить стабильный, селективный и отзывчивый сенсорный интерфейс, что улучшает аналитические характеристики. Благодаря превосходным характеристикам наноматериалов, развитие наноматериалов в области электрохимических исследований получило дальнейшее развитие, а также расширились возможности электрохимического обнаружения слабоактивных веществ. Например, металлические наноматериалы, включая наночастицы золота, наночастицы серебра, кластеры золота, кластеры меди, углеродные нанотрубки и графеновые наноматериалы, были использованы для электрохимического обнаружения GSH.

 

Углеродные нанотрубки, включая одностенные углеродные нанотрубки (SWCNTs) и многостенные углеродные нанотрубки (MWCNTs), обладающие хорошими проводящими свойствами и высокой удельной поверхностью, уже много раз применялись для определения GSH. Модификация углеродных нанотрубок на электроде-подложке может ускорить перенос электронов между GSH и поверхностью электрода и значительно снизить оверпотенциал. Например, пиковый потенциал окисления GSH на электроде SWCNTs/GC находится при +0,55 В, что на 0,45 В ниже, чем на голом электроде GC при +1,0 В. Электрод GC, модифицированный SWCNTs, может использоваться для многократного обнаружения GSH, и чувствительность обнаружения не будет снижаться из-за пассивации электрода загрязнениями.

 

Гонг и др.[14] использовали MWCNTs, допированные в силикагеле, для приготовления композитных электродов из керамики и углеродных нанотрубок (CCNNEs) для определения GSH. Электрохимическое поведение электродов, приготовленных этим золь-гель методом, настраивается в зависимости от количества MWCNTs, диспергированных в силикагеле, и электроды демонстрируют циклические вольтамперограммы электродов обычного размера при высоком содержании MWCNTs (более 1,5 мг/мл); и электроды демонстрируют циклические вольтамперограммы электродов нормального размера при модификации низким содержанием MWCNTs (менее 0,1 мг/мл). При допировании высоким содержанием MWCNTs (более 1,5 мг/мл) модификация материала на поверхности электродов GC приводила к тому, что электроды демонстрировали циклические вольтамперограммы электродов обычного размера; при допировании низким содержанием MWCNTs (менее 0,1 мг/мл) материал приводил к тому, что электроды демонстрировали циклические вольтамперограммы микроэлектродов, и материал оказывал значительный электрокаталитический эффект на окисление GSH. Графен (GR), включая восстановленный графен (rGO) и окисленный графен (GO), также является разновидностью углеродного материала с хорошими электрохимическими каталитическими свойствами и неоднократно применялся для электрохимического определения GSH. Yuan et al. [15] сравнили электрохимическое поведение GSH на электродах GO/GC, полученных восстановлением при различных потенциалах восстановления, и результаты показали, что GO, восстановленный при -0,75 В, обладает наилучшим электрокаталитическим эффектом на окисление GSH. Результаты показали, что GO, восстановленный при потенциале -0,75 В, оказывал наилучший электрокаталитический эффект на окисление GSH, а окисление GSH могло происходить при +0,3 В. Они приписали электрокаталитический эффект карбоксильным и карбонильным группам на краю GO.

 

Для того чтобы еще больше снизить предел обнаружения, различные металлические наноматериалы, включая золото, серебро, медь, никель, алюминий и платину, широко используются для модификации поверхности электродов для электрохимического определения GSH.Dong et al.[16] в качестве рабочего электрода использовали ГХ-электрод (Ni-Al DHs/ GCE) на основе совместной модификации MWCNTs и электроосажденных бис-гидроксилированных гидроксилов никеля и алюминия (Ni-Al LDHs). В качестве рабочего электрода использовались MWCNTs/GCE). Результаты эксперимента показали, что при сочетании Ni-AlLDHs и MWCNTs ток отклика GSH в Ni-Al LDHs/MWCNTs/GCE был значительно выше, чем в MWCNTs/GCE и Ni-Al LDHs/GCE, а пиковый потенциал сместился к отрицательному полюсу, и анодный ток более чем в десять раз превышал таковой в Ni-Al LDHs/GCE, а предел обнаружения достигал 0,7 мкМ, что указывает на возможность использования комбинированных Ni-Al LDHs и MWCNTs в качестве рабочего электрода. Стоянови и другие [17] использовали Sb2 O3(триоксид сурьмы)-модифицированный угольный электрод (CPE) в качестве рабочего электрода для обнаружения GSH и GSSG, и предел обнаружения GSH и GSSG составил 0,7 мкМ, что указывает на то, что сочетание Ni-Al LDHs и MWCNTs оказывает хороший электрокаталитический эффект на GSH, и чувствительность обнаружения значительно повышается. Пределы обнаружения GSH и GSSG составили 0,34 мкМ и 0,10 мкМ для GSH и GSSG, соответственно. Другие наноматериалы, такие как Pd, IrO2, TiO2, Cu, Pt, Au, MnO2 и т.д. [21-24], наноматериалы и нанокластеры в различных формах, а также электроды, модифицированные соединениями металлоорганического каркаса [11], также были использованы для обнаружения GSH.

 

В заключение следует отметить, что электрод-подложка, модифицированный наноматериалами, может уменьшить перепотенциал, повысить чувствительность и снизить предел обнаружения. С развитием материаловедения все больше наноматериалов используется для модификации электрода-подложки, чтобы улучшить чувствительность обнаружения, но добавление модифицирующих материалов может улучшить чувствительность как к тест-объекту, так и к помехам, однако селективность для тест-объекта остается низкой.

 

4 Применение электронных посредников для электрохимического определения GSH

В дополнение к наноматериалам на поверхности электродов часто модифицируют электронные посредники, чтобы повысить чувствительность обнаружения и улучшить селективность метода. Электронные посредники обычно имеют небольшую молекулярную массу и переносят электроны между измеряемым материалом и электродом, делая материал более восприимчивым к окислительно-восстановительным процессам на поверхности электрода. В зависимости от химических и электрохимических свойств измеряемого материала могут быть выбраны различные электронные посредники.

 

Как правило, при выборе электронного посредника, во-первых, выбранное вещество должно обладать хорошей электрохимической активностью, то есть быстро переносить электроны на поверхность электрода, а во-вторых, оказывать хорошее электрокаталитическое действие на тестируемое вещество. Известные электронные посредники для электрохимического определения GSH включают ферроцен, металлопорфириновые комплексы, металлические производные бипиридина, 7,7,8,8-тетрацианохинодиметан, ацетиламино, катехолы и их производные, а также другие электронные посредники для определения GSH.Yuan et al.[20] сообщили об электронном посреднике на основе комбинации 7,7,8,8-тетрацианохинодиметана (TCNQ) и катодсодержащих хинолинов. Юань и др.[20] сообщили о создании стеклоуглеродного электрода на основе 7,7,8,8-тетрацианохинолиндиметана (TCNQ) и графенового rGO-модифицированного стеклоуглеродного электрода для определения GSH, причем TCNQ использовался в качестве электронного посредника, а rGO/GC - в качестве рабочего электрода. TCNQ/rGO-модифицированный стеклоуглеродный электрод был способен обнаруживать GSH при -50 мВ, что снижало перепотенциал оксигенации GSH, а также имел широкий линейный диапазон и низкий предел обнаружения и был успешно применен для определения GSH в глазных каплях.

В заключение следует отметить, что превосходная проводимость и электрокаталитическая способность новых наноматериалов может повысить чувствительность обнаружения, а выбор подходящих электронных посредников может улучшить селективность электрохимического обнаружения GSH, поэтому существует несколько сообщений о сочетании наноматериалов и электронных посредников для обнаружения GSH.

 

5 Заключение

Катехол, катехол и его производные (включая катехол, дофамин, кофейную кислоту, норадреналин и т.д.) и т.д.[18-24] . Катехол и его производные уже много раз использовались в качестве электроноакцепторов восстановленных тиолов, в том числе GSH, и из обобщения результатов нескольких исследований можно сделать вывод о следующих двух механизмах реакции: первый - это электрохимически катализируемый механизм реакции окисления (как показано на рис. 3А). В этом механизме катехол и его производные выступают только в качестве медиаторов электронов, катализируя электрохимическое окисление восстановленных малых молекул тиолов на поверхности электрода, что приводит к появлению циклической вольтамперограммы с увеличением пика каталитического окисления и уменьшением пика восстановления. Второй - механизм реакции ECE[22] (показан на рисунке 3B), т.е. медиатор электронов катехол и его производные A сначала электрохимически окисляются на поверхности электрода для получения о-бензохинона B. Сульфгидрильная группа восстановленной малой молекулы меркаптана, SH, обладает сильной нуклеофильностью, и таким образом атакует о-бензохинон B в реакции нуклеофильного замещения, приводя к сульфгидрильно-замещенному продукту C. При дальнейшем электрохимическом окислении C на поверхности электрода образуется D, который может принимать пики окисления и уменьшать пики восстановления. D может быть подвергнут дальнейшей атаке -SH восстановленных тиолов малых молекул с получением димеркаптозамещенного продукта E; E может быть электрохимически окислен на поверхности электрода с получением F.

 

Потенциал электрохимического окисления моно- и димеркаптозамещенных продуктов C и E отличается от потенциала электронного посредника катехола и его производного A, т.е. на циклической вольтамперограмме появляется новый пик, и восстановленные прототипические тиолы можно количественно определить по текущим значениям новых пиков.McCarley et al. предположил, что GSH проходит второй механизм реакции ECE, тогда как цистеин и гомоцистеин, которые имеют сходную структуру с GSH, обычно проходят первый механизм реакции, поэтому многие отчеты основывают количественное определение GSH на реакции GSH с катехолом и его производным для получения новых пиков. McCarley et al. предположили, что GSH проходит по второму механизму реакции ECE, в то время как цистеин и гомоцистеин, сходные по структуре с GSH, обычно проходят по первому механизму реакции. В нашей группе[23] GSH определяли косвенно по образованию продукта замещения катехол-GSH и пику окисления этого продукта. Новый пик находился при -0,16 В, что более отрицательно, чем потенциал пика окисления 0,60 В для GSH и 0,20 В для о-фенола, а другие тиолы и физиологически активные вещества практически не мешали обнаружению GSH в определенном диапазоне концентраций при таком потенциале. В данной работе предложен высокоселективный метод обнаружения GSH. В данной работе представлен высокоселективный анализ GSH для определения внутриклеточной утечки GSH после апоптоза, вызванного адриамицином, в клетках HeLa.

 

Учитывая важную физиологическую и патологическую роль восстановленного глутатиона GSH, точное и быстрое определение GSH в организмах имеет большое значение. В данной работе были подробно проанализированы принципы, преимущества и недостатки методов определения GSH, разработанных на основе электрохимических методик, с точки зрения электрода-подложки, наноматериалов и медиаторов электронов. Чувствительность и селективность метода были улучшены за счет выбора электрода-подложки и сочетания с наноматериалами и электронными медиаторами.

 

Учитывая сегодняшние потребности аналитической химии, существующие электрохимические методы все еще необходимо применять для клинических испытаний и полевого анализа, поэтому миниатюризация электродов и разработка одноразовых электродов для тестирования являются будущей тенденцией развития. Однако существуют следующие проблемы: для разработки недорогих микроэлектродов и одноразовых электродов слишком сложные методы модификации поверхности электрода будут неприменимы; слишком дорогие материалы и методы модификации будут отменены; кроме того, установленные электрохимические методы должны быть перенесены с обычных электродов на микроэлектроды и одноразовые электроды, и модификация электродов станет сложной; даже если для микроэлектродов будут использоваться тот же метод и те же материалы для модификации, то для микроэлектродов будут использоваться тот же метод и те же материалы для модификации, что приведет к повышению чувствительности по сравнению с обычными электродами. Даже если для микроэлектродов используется тот же метод и тот же модифицированный материал, чувствительность снижается или даже электрохимическое поведение отличается по сравнению с обычными электродами. Исследователям необходимо продолжить изучение и поиск подходящих материалов и методов модификации электродов для микроэлектрохимических устройств обнаружения, чтобы обеспечить высокую каталитическую активность и селективность модифицированных материалов, а также точность обнаружения, и в то же время сделать обнаружение проще и дешевле.

 

Ссылки:

[1] Rosa A R, Singh N, Whitaker, et al. Измененный уровень глутатиона в плазме крови при биполярном расстройстве указывает на повышенный окислительный стресс; возможный фактор риска возникновения заболевания, несмотря на нормальный уровень нейротрофического фактора мозга (BDNF) [J] . для начала заболевания, несмотря на нормальный уровень нейротрофического фактора мозга (BDNF) [J] .  Психологическая медицина , 2014 , 44(11) :2 409 - 2 418.

[2] Kohen R , Nyska A. Invited Review: Oxidation of Biological Systems: Oxidative Stress Phenomena, Antioxidants, Redox Reactions, and Methods for Их количественная оценка[J] .  Токсикологическая патология, 2002, 30

(6) :620-650.

[3] Liu H , Wang H , Shenvi S , et al. Glutathione metabolism during aging and in Alzheimer disease[ J] .   Annals of the New York Academy of Sciences, 2010, 1 019(1) :346-349.

[4] Roederer M , Staal F J , Anderson M , et al. Disregulation of Leukocyte Glutathione in AIDS [ J ] .    Анналы Нью-Йоркской академии наук, 2010, 677 :113-125.

[5] Рахман И. Регуляция глутатиона при воспалении и хронических заболеваниях легких[J] .  Mutation Research/fundamental & Molecular Mechanisms of Mutagenesis , 2005 , 579(1-2) :58-80.

[6] Jung H S , X Chen , Kim J S , et al. Recent progress in luminescent and colorimetric chemosensors for detection of thiols [J] .  Chemical Society Reviews, 2013, 42(14) :6 019.

[7] Gennaro M C , Abrigo C. Разделение восстановленного и окисленного глутатиона в фармацевтическом препарате с помощью ионно-взаимодействующей обращенно-фазовой ВЭЖХ [J] .  Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 1992, 10(1) :61.

[8] Zhang J , Hu Z , Chen X. Количественное определение глутатиона и дисульфида глутатиона в плазме крови человека и листьях табака методом капиллярного электрофореза с лазерно-индуцированной флуоресценции[J] .  Таланта, 2005, 65(4) :986-990.

[9] Hanko M , Svorc L , Plankov A , et al. Обзор и последние достижения в электрохимическом зондировании глутатиона - обзор [J] .  Analytica Chimica Acta, 2019, 1 062 :1-27

[10] Nesakumar N , Berchmans S , Alwarappan S. Chemically modified carbon based electrodes for the detection of reduced glutathione[ J] .  Sensors and Actuators, 2018, B264 :448-466.

[11] Xie J W , Cheng D , Li P P , et al. Au/Metal- Organic Framework Nanocapsules for Electrochemical Determination of Glutathione [ J] .  ACS Appl. Nano Mater. , 2021 ,4(5) :4 853-4 862.

[12] Lv Y , Yang L L , Mao X X , et al. Электрохимическое обнаружение глутатиона на основе Hg2+ - опосредованной стратегии реакции смещения прядей[J] .  Biosensors & Bioelectronics, 2016, 85 :664-668.

[13] Liu T T , Zhou M , Pu Y X , et al. Silver nanoparticle-functionalized 3D flower - like copper ( II) - porphyrin framework nanocomposites as signal как усилители сигнала для изготовления чувствительного электрохимического сенсора глутатиона[J] . Sensors and Actuators : B. Chemical, 2021, 342 :130 047.

[14] Gong K P , Zhang M N , Yan Y M , et al. Sol-Gel-Derived Ceramic- Carbon Nanotube Nanocomposite Electrodes: Tunable Electrode Dimension and Potential Электрохимические применения [ J ].   Anal. Chem. 2004 , 76(21) :6 500-6 505.

[15] Yuan B Q , Zeng X Y , Xu C Y , et al. Электрохимическая модификация оксида графена, содержащего различные типы кислородных функциональных видов, для электро-. каталитического окисления восстановленного глутатиона[J] . Sensors and Actuators B, 2013 , 184 :15-20.

[16 ] Dong Y , Sheng Q L , Zheng J B , et al. A nonenzymatic reduced glutathione sensor based on Ni- AL LDHs/WMCNTs composites[J] .  Anal. Methods , 2014 , 6(21) :8 598-8 603.

[17] Stojanovi Z S , urovi A D , Amir M. et al. Highly sensitive

одновременное электрохимическое определение восстановленного и окисленного глутатиона в образцах мочи с использованием модифицированного триоксидом сурьмы угольного пастообразного электрода электрода[ J] . Sensors & Actuators : B. Chemical, 2020, 318 : 128 141.

[18] Rawat B , Mishra K K , Barman U , et al. Two - Dimensional MoS2 - Based Electrochemical Biosensor for Highly Selective Detection of Glutathione [J] .  IEEE Sensors Journal, 2020, 20(13) :6 937-6 944.

[19] Karimi-maleh H , Tahernejad-javazmi F , Ensa A A , et al. A high sensitive biosensor based on FePt/CNTs nanocomposite/N - ( 4 - hydroxyphenyl) -3 ,5- динитробензамида для одновременного определения глутатиона и пироксикама [ J ].  Биосенсоры и биоэлектроника, 2014, 60 :1-7.

[20] Yuan B Q , Xu C Y , Zhang R C , et al. Стеклоуглеродный электрод, модифицированный 7,7,8,8 - тетрацианохинодиметаном и оксидом графена, вызвал Синергетический эффект: низкопотенциальное амперометрическое обнаружение восстановленного глутатиона[J] . Биосенсоры и биоэлектроника, 2017, 96 :1-7.

[21] Lei P, Zhou Y, Zhu R Q, et al. Легкий синтез нанокомпозитов на основе фталоцианина железа, функционализированного N,B-допированным восстановленным оксидом графена, и чувствительный электрохимического обнаружения глутатиона [ J ].    Sensors & Actuators : B. Chemical, 2019, 297 :126 756.

[22] Pacsial-Ong E J , McCarley R L , et al. Электрохимическое обнаружение глутатиона с использованием окислительно-восстановительных индикаторов[J] .  Аналитическая химия, 2006, 78(21) :7 577-7 581.

[23] Zhao L Z , Zhao L , Miao Y Q , et al. Селективное электрохимическое определение глутатиона по утечке внутриклеточного содержания GSH в клетках HeLa после доксорубицина - индуцированного апоптоза клеток [J] . Electrochimica Acta. 2016 , 206 :86-98.

[24] Lee P T , Ward K R , Tschulik K , et al. Электрохимическое обнаружение глутатиона с использованием поли(кофейной кислоты) наноуглеродного композитного модифицированного электрода[J ] . Электроанализ, 2014 , 26(2) :366-373.